Partículas Lentivirales de Activación (h) Thrombospondin 2: sc-401207-LAC

THBS2 codifica la trombospondina 2, una glucoproteína matricelular secretada que modula la organización de la matriz extracelular, la fibrilogénesis del colágeno y la comunicación célula–matriz. La trombospondina 2 influye en la adhesión, la migración y la remodelación tisular al interactuar con integrinas, proteoglucanos y componentes de la señalización de factores de crecimiento, configurando vías relacionadas con la angiogénesis y la reparación de heridas. La alteración de la expresión de THBS2 se ha asociado con la remodelación fibrótica, las interacciones tumor–estroma y fenotipos vasculares o del tejido conectivo, lo que la convierte en un punto de partida útil para estudiar la regulación del comportamiento celular impulsada por la matriz extracelular.

Las partículas de activación lentiviral Thrombospondin 2 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de THBS2 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Thrombospondin 2 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción THBS2, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Thrombospondin 2. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo THBS2 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.