Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) TF: sc-401060-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TF correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TF Double Nickase (h) et le plasmide TF Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant F3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TF Antibody (H-9): sc-374441
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TF | sc-401060-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TF | sc-401060-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain F3 code le facteur tissulaire (TF), un initiateur transmembranaire de la voie extrinsèque de la coagulation qui forme un complexe avec le facteur VII/VIIa afin de déclencher en aval la génération de thrombine et la formation de fibrine. Au-delà de l’hémostase, la signalisation protéolytique dépendante du TF recoupe l’activation des PAR, les réponses inflammatoires, l’angiogenèse et les interactions endothélium–monocytes qui façonnent la biologie vasculaire. L’expression de F3 est strictement régulée par les cytokines et les voies de signalisation du stress, et elle est fréquemment étudiée dans le contexte de la thrombose, de l’athérosclérose, des coagulopathies associées au sepsis et de l’activité procoagulante liée au microenvironnement tumoral. Ces fonctions font du TF un nœud utile pour disséquer le dialogue entre les voies de la coagulation et celles de l’immunité innée.
TF Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus F3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de F3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de F3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de F3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.