Plasmide Double Nickase (h) TERT: sc-400316-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TERT correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TERT Double Nickase (h) et le plasmide TERT Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TERT. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TERT Antibody (A-6): sc-393013
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TERT | sc-400316-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TERT | sc-400316-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **TERT** code la sous-unité catalytique à activité transcriptase inverse de la télomérase, qui allonge les répétitions d’ADN télomérique et contrecarre le raccourcissement progressif des télomères lors de la réplication de l’ADN. En régulant la longueur des télomères et leur coiffage, TERT soutient la stabilité chromosomique, la capacité réplicative et la signalisation des points de contrôle des dommages à l’ADN, en s’inscrivant à l’intersection de voies telles que les réponses médiées par ATM/ATR et les programmes de sénescence. Une activité TERT altérée est associée à des troubles de la biologie des télomères, à l’instabilité du génome et à des processus oncogéniques, ce qui en fait un nœud central pour l’étude de l’immortalisation cellulaire, de la sénescence induite par le stress et de l’évolution clonale. TERT est également étudiée pour des fonctions non canoniques dans la régulation transcriptionnelle et l’homéostasie mitochondriale, susceptibles d’influencer la prolifération et la tolérance au stress.
TERT Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TERT dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TERT. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TERT. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TERT.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.