TEM5 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-407178

개요

ADGRA2(TEM5)는 큰 세포외 영역을 가진 부착성 G 단백질 결합 수용체(adhesion GPCR)를 암호화하며, 이 영역은 세포–세포 및 세포–기질 상호작용을 지원하고 세포외 신호를 세포내 신호전달과 연결합니다. 부착성 GPCR 계열의 일원으로서 TEM5는 내피세포의 거동, 혈관 및 조직 재형성, 그리고 GPCR 연계 경로를 통한 세포골격 조직화 조절과 같은 과정과 관련됩니다. TEM5의 발현은 종양 연관 혈관과 기질 재형성과 관련된 맥락에서 보고되어, 혈관신생 신호전달과 미세환경 조절 연구에서 관심 대상입니다. ADGRA2의 기능을 규명하는 것은 부착성 GPCR 신호가 사람 세포에서 세포외 부착 역학을 전사 반응 및 세포골격 반응과 어떻게 통합하는지 밝히는 데 도움이 될 수 있습니다.

TEM5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 ADGRA2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ADGRA2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ADGRA2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TEM5 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TEM5 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ADGRA2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TEM5 기능에 중요한 ADGRA2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ADGRA2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TEM5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 TEM5 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ADGRA2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TEM5 HDR 플라스미드 (h) 및 TEM5 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ADGRA2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ADGRA2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.