TECPR2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-411378

Übersicht

TECPR2 (tectonin beta-propeller repeat containing 2) kodiert ein großes zytosolisches Scaffold-Protein, das an autophagiebezogenem Membrantransport und der Proteostase beteiligt ist. Durch Interaktionen mit der Autophagie-Maschinerie unterstützt TECPR2 die Handhabung von Fracht und Schritte des vesikulären Transports, die den Abbau fehlgefalteter Proteine und geschädigter Organellen beeinflussen – Prozesse, die zentral für die neuronale Homöostase sind. Genetische Störungen von TECPR2 wurden mit neuroentwicklungsbezogenen und neurodegenerativen Phänotypen in Verbindung gebracht, was zu einer Rolle bei der Aufrechterhaltung langlebiger Zelltypen mit hohem proteostatischem Bedarf passt. TECPR2 ist daher relevant für die Untersuchung der Autophagie-Regulation, des intrazellulären Traffickings und von Stressantwort-Signalwegen in humanen Zellmodellen.

Das TECPR2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des TECPR2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des TECPR2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von TECPR2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TECPR2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von TECPR2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TECPR2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf TECPR2-Exone abzielen, die für die TECPR2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere TECPR2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TECPR2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom TECPR2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des TECPR2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TECPR2 HDR-Plasmid (h) und TECPR2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von TECPR2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten TECPR2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.