Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO TECK (m): sc-422841
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- TECK Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique TECK, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TECK Antibody (YY05): sc-80344
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO TECK (m) | sc-422841 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Ccl25 code la chimiokine exprimée dans le thymus (TECK), une chimiokine de type CC qui signale principalement via CCR9 afin d’orienter la migration chimiotactique et le positionnement des leucocytes CCR9+. Chez la souris, TECK contribue au trafic des cellules immunitaires au sein des microenvironnements thymiques et des tissus muqueux, façonnant le homing des lymphocytes, la surveillance tissulaire et l’organisation immunitaire régionale. La signalisation en aval mobilise des voies dépendantes des GPCR, notamment PI3K/AKT et les cascades MAPK, qui régulent la motilité, l’adhésion et le remodelage du cytosquelette. Une activité dérégulée de l’axe Ccl25–CCR9 a été impliquée dans l’infiltration immunitaire inflammatoire et une localisation lymphocytaire altérée, en lien avec l’inflammation des muqueuses et des modèles de distribution des cellules immunitaires associées aux tumeurs.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO TECK (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Ccl25 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Ccl25, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Ccl25 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine TECK.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Ccl25 pour l'étude de la signalisation de TECK, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Ccl25 essentiels à la fonction de TECK
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Ccl25 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le TECK plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le TECK plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Ccl25. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le TECK plasmide HDR (m) et le TECK (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Ccl25 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Ccl25 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.