Plásmido Doble Nickase (m) Tctex1: sc-423318-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Tctex1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Tctex1 (m) y el plásmido de doble nickasa Tctex1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Dynlt1b. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Tctex1 | sc-423318-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) Tctex1 | sc-423318-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Dynlt1b codifica la cadena ligera Tctex1 del ratón de la dineína citoplasmática, un complejo motor basado en microtúbulos que impulsa el transporte retrógrado, el posicionamiento de orgánulos y funciones del huso mitótico. Tctex1 contribuye al tráfico de vesículas y complejos proteicos dependiente de la dineína, respaldando procesos como la señalización intracelular, el transporte neuronal y la ciliogénesis mediante una dinámica coordinada de los microtúbulos. La alteración de las interacciones de las cadenas ligeras de la dineína puede afectar la unión de la carga y la fidelidad del transporte, vinculando la disfunción de la vía de la dineína con fenotipos relevantes para el neurodesarrollo, la biología de los cilios y el control de la división celular. En consecuencia, Dynlt1b se estudia con frecuencia en el contexto de la regulación del citoesqueleto, la organización del centrosoma/huso y las vías de señalización dependientes del transporte.
Tctex1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Dynlt1b en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Dynlt1b. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Dynlt1b. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Dynlt1b alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.