Plasmide CRISPR/Cas9 KO TCL-1B (h): sc-407297

Présentation

TCL1B code pour TCL-1B, un membre de la famille TCL1 impliqué dans la modulation de la signalisation intracellulaire qui régit la croissance et la survie des cellules lymphoïdes. Les protéines de la famille TCL-1 ont été associées à la régulation des voies dépendantes d’AKT/PKB et des programmes transcriptionnels en aval qui influencent la prolifération, l’apoptose et l’adaptation métabolique. L’expression aberrante des membres de la famille TCL1 est fréquemment étudiée dans le contexte des hémopathies malignes et des dysrégulations de la biologie des cellules B et T, où une modification des seuils de signalisation peut contribuer à la transformation oncogénique et à la progression de la maladie. Ainsi, TCL1B est utilisé comme levier moléculaire pour disséquer le remodelage des réseaux de signalisation et les vulnérabilités spécifiques de lignée dans des modèles de cellules immunitaires et cancéreuses.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO TCL-1B (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène TCL1B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du TCL1B, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert TCL1B à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine TCL-1B.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en TCL1B pour l'étude de la signalisation de TCL-1B, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de TCL1B essentiels à la fonction de TCL-1B
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de TCL1B pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le TCL-1B plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le TCL-1B plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus TCL1B. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le TCL-1B plasmide HDR (h) et le TCL-1B (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie TCL1B pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles TCL1B définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.