Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
TCL-1B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407297
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TCL-1B El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TCL-1B, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TCL-1B Anticuerpo (H-3): sc-365169
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TCL-1B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407297 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
TCL1B codifica TCL-1B, un miembro de la familia TCL1 implicado en la modulación de la señalización intracelular que regula el crecimiento y la supervivencia de las células linfoides. Las proteínas de la familia TCL-1 se han relacionado con la regulación de vías dependientes de AKT/PKB y de programas transcripcionales posteriores que influyen en la proliferación, la apoptosis y la adaptación metabólica. La expresión aberrante de miembros de la familia TCL1 se estudia con frecuencia en el contexto de neoplasias hematológicas y de la biología alterada de células B y T, donde los cambios en los umbrales de señalización pueden contribuir a la transformación oncogénica y a la progresión de la enfermedad. Por ello, TCL1B se utiliza como una herramienta molecular para analizar la reconfiguración de redes de señalización y vulnerabilidades específicas de linaje en modelos de células inmunes y cancerosas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TCL-1B (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TCL1B en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TCL1B junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TCL1B tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TCL-1B.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TCL1B para la investigación de la señalización de TCL-1B, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de TCL1B críticos para la función de TCL-1B
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TCL1B para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TCL-1B CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TCL-1B CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TCL1B. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TCL-1B (h) y el plásmido HDR TCL-1B (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TCL1B para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TCL1B definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.