Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
TC-PTP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422509
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- TC-PTP El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico TC-PTP, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: TC-PTP Anticuerpo (D-3): sc-398997
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
TC-PTP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422509 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen murino Ptpn2 codifica la fosfatasa de tirosina proteica de células T (TC-PTP), una PTP no receptora que desfosforila intermediarios clave de señalización para restringir las vías de citocinas y factores de crecimiento. TC-PTP regula negativamente la señalización JAK/STAT y puede modular eventos de fosforilación asociados al receptor de insulina y al EGFR, configurando programas transcripcionales que controlan la proliferación, la supervivencia y la activación inmunitaria. A través de estas funciones, Ptpn2 ayuda a mantener la homeostasis inmunitaria y la integridad de la barrera epitelial, y su desregulación se ha vinculado a fenotipos inflamatorios y autoinmunes, así como a una señalización alterada asociada a tumores en modelos experimentales. En consecuencia, Ptpn2 se estudia ampliamente para entender los mecanismos de respuesta a citocinas, los umbrales de señalización de células T y la biología de enfermedades impulsadas por la inflamación.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO TC-PTP (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ptpn2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ptpn2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ptpn2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TC-PTP.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ptpn2 para la investigación de la señalización de TC-PTP, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Ptpn2 críticos para la función de TC-PTP
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ptpn2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido TC-PTP CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido TC-PTP CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ptpn2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TC-PTP (m) y el plásmido HDR TC-PTP (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ptpn2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ptpn2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.