Particules Lentivirales d'Activation (h) TBX2: sc-403078-LAC

TBX2 code un facteur de transcription de type T-box qui se lie à des éléments d’ADN spécifiques de séquence afin de réguler les programmes d’expression génique du développement et la progression du cycle cellulaire. Dans les cellules humaines, TBX2 agit souvent comme un répresseur transcriptionnel qui contribue au contrôle de la prolifération, au contournement de la sénescence et à la spécification des lignages, en coordination avec des complexes de remodelage de la chromatine et de corépresseurs. Son activité recoupe des voies impliquées dans le contrôle G1/S et la différenciation, et une expression dérégulée de TBX2 a été rapportée dans de multiples contextes tumoraux, où elle peut influencer la croissance et des phénotypes invasifs. En tant que régulateur nucléaire, TBX2 est fréquemment étudié pour son rôle dans des réseaux transcriptionnels qui façonnent l’organogenèse, les dynamiques épithélio-mésenchymateuses et les programmes de réponse au stress.

Les particules d'activation lentivirales TBX2 (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de TBX2 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales TBX2 (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription TBX2, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de TBX2. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif TBX2 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.