Plasmide Double Nickase (h) TBX2: sc-403078-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TBX2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TBX2 Double Nickase (h) et le plasmide TBX2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TBX2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TBX2 Antibody (D-3): sc-514291
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TBX2 | sc-403078-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TBX2 | sc-403078-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TBX2 code un facteur de transcription de la famille T-box qui régule des programmes d’expression génique du développement et coordonne les choix de destinée cellulaire en se liant à des motifs spécifiques de l’ADN et en modulant une transcription dépendante de la chromatine. Dans les cellules humaines, TBX2 influence la progression du cycle cellulaire et les voies associées à la sénescence en réprimant des réseaux suppresseurs de tumeurs, notamment CDKN2A/p14ARF et CDKN1A/p21, avec des effets en aval sur la prolifération et la différenciation. Une activité dérégulée de TBX2 a été associée à une spécification de lignée altérée et à un contrôle anormal de la croissance, ce qui en fait un nœud utile pour étudier les circuits transcriptionnels en biologie du développement et du cancer. La régulation génique dépendante de TBX2 est également étudiée dans le contexte des dynamiques épithélio-mésenchymateuses et des interactions (crosstalk) entre voies de signalisation liées à l’organogenèse.
TBX2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TBX2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TBX2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TBX2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TBX2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.