Plasmide Double Nickase (h) TBC1D23: sc-417378-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TBC1D23 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TBC1D23 Double Nickase (h) et le plasmide TBC1D23 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TBC1D23. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TBC1D23 | sc-417378-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TBC1D23 | sc-417378-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TBC1D23 code une protéine contenant un domaine TBC (Tre-2/Bub2/Cdc16) qui intervient dans le trafic vésiculaire et le tri des cargos, avec des rôles rapportés dans la coordination du transport des endosomes vers l’appareil de Golgi via des interactions avec la machinerie d’ancrage des golgines. En influençant la dynamique membranaire et la localisation des protéines, TBC1D23 contribue à l’organisation intracellulaire des voies de signalisation et de sécrétion pertinentes pour le développement neuronal et les cellules polarisées. La perturbation de TBC1D23 a été associée à des phénotypes neurodéveloppementaux et à des altérations de la morphologie cérébrale, ce qui étaye son importance dans la formation des circuits neuronaux et l’homéostasie cellulaire. Ces caractéristiques font de TBC1D23 une cible utile pour étudier, dans des modèles humains, la régulation dépendante du trafic de la distribution des protéines, des processus synaptiques ou axonaux, ainsi que des phénotypes cellulaires pertinents pour les maladies.
TBC1D23 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TBC1D23 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TBC1D23. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TBC1D23. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TBC1D23.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.