
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Tankyrase-1CRISPR激活质粒(h) | sc-400749-ACT | 20 µg | $397.00 |
TNKS 编码 tankyrase-1,这是一种多聚(ADP-核糖)聚合酶,可通过依赖 PARylation 的方式招募泛素连接酶,从而调控蛋白质周转与支架组装。Tankyrase-1 通过靶向 AXIN 降解来调节 Wnt/β-连环蛋白信号通路;同时还可通过与 TRF1 及其他修复与中心体相关因子的相互作用,参与端粒维持、有丝分裂进程以及 DNA 损伤应答。由于其会影响基因组稳定性与增殖信号,TNKS 常在致癌通路失调和染色体不稳定等研究背景中被重点关注。其广泛的底物网络使其成为一个有用的关键节点,可用于探究 PARP 生物学、泛素介导的蛋白质稳态调控与细胞周期控制之间的通路串扰。
Tankyrase-1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性TNKS的表达。
Tankyrase-1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的TNKS基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于TNKS转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Tankyrase-1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的TNKS位点,并能够研究内源性位点上依赖于Tankyrase-1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在TNKS表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Tankyrase-1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。