TALL-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406502

概要

TNFSF13Bは、B細胞の生存・成熟および免疫グロブリン産生に必須のTNFスーパーファミリーサイトカインであるTALL-1（BAFFとも呼ばれる）をコードしています。TALL-1はBAFF-R、TACI、BCMAなどの受容体を介してシグナルを伝達し、NF-κBおよび関連する生存経路を活性化することで、末梢B細胞の恒常性と体液性免疫応答を制御します。TNFSF13Bの発現やシグナル伝達の破綻は、B細胞トレランスの変化や形質細胞の異常な持続と関連し、この軸が自己免疫に伴う免疫活性化やB細胞主導の炎症状態に関与することを示唆します。また、可溶性および膜結合性リガンドとしてのTALL-1は、リンパ組織や炎症性微小環境における免疫細胞間クロストークにも影響を及ぼします。

TALL-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTNFSF13B遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TNFSF13B内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TNFSF13Bのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TALL-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TALL-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TNFSF13B欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TALL-1の機能に不可欠なTNFSF13Bエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TNFSF13Bゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TALL-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTALL-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TNFSF13B遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TALL-1 HDRプラスミド（h）および TALL-1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTNFSF13Bホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTNFSF13B標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。