Plasmide Double Nickase (m) TAL2: sc-423262-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) TAL2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TAL2 Double Nickase (m) et le plasmide TAL2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Tal2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) TAL2 | sc-423262-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) TAL2 | sc-423262-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin *Tal2* code TAL2, un facteur de transcription à domaine hélice-boucle-hélice basique (bHLH) qui intervient dans des programmes de régulation génique en s’associant à d’autres protéines bHLH et en se liant à des éléments contenant des boîtes E (E-box) afin d’influencer la spécification des lignages et la différenciation cellulaire. L’activité de TAL2 est liée à des réseaux de contrôle transcriptionnel qui façonnent les processus de développement hématopoïétiques et neuronaux, où une régulation précise de l’expression des gènes cibles est nécessaire à une maturation normale. Une dérégulation des circuits transcriptionnels de la famille TAL a été impliquée dans une prolifération aberrante et des états de différenciation modifiés dans des modèles de malignités hématologiques, faisant de *Tal2* un locus utile pour étudier les dépendances à des facteurs de transcription oncogéniques. L’étude de *Tal2* dans des systèmes murins permet une dissection mécanistique des voies transcriptionnelles pilotées par les bHLH, des effets du contexte chromatini en, et des programmes d’expression génique en aval.
TAL2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Tal2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Tal2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Tal2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Tal2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.