Plasmide Double Nickase (h) TAF5L: sc-408861-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TAF5L correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TAF5L Double Nickase (h) et le plasmide TAF5L Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TAF5L. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TAF5L | sc-408861-NIC | 20 µg | $410.00 |
TAF5L code une protéine de type « TBP-associated factor » qui participe à l’initiation de la transcription en contribuant à l’assemblage et à la stabilité des complexes de préinitiation de l’ARN polymérase II. En tant que composant associé à la régulation transcriptionnelle liée à TFIID/SAGA, TAF5L aide à coordonner la reconnaissance des promoteurs, le contrôle de l’expression génique dépendant de la chromatine et des programmes transcriptionnels liés à l’identité cellulaire et à la prolifération. Une altération de la fonction de TAF5L peut perturber l’homéostasie transcriptionnelle globale et a été étudiée dans le contexte de la dérégulation transcriptionnelle observée dans le cancer et d’autres maladies où l’architecture des promoteurs et l’équilibre des coactivateurs sont modifiés. Ces caractéristiques font de TAF5L une cible utile pour des études mécanistiques des réseaux de facteurs de transcription fondamentaux et de la régulation des gènes couplée à la chromatine.
TAF5L Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TAF5L dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TAF5L. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TAF5L. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TAF5L.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.