Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO T6BP (h): sc-404858
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- T6BP Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique T6BP, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: T6BP Antibody (H-6): sc-393143
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO T6BP (h) | sc-404858 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
TAX1BP1 code pour T6BP, une protéine adaptatrice qui coordonne la signalisation dépendante de l’ubiquitine à l’interface de l’immunité innée, du contrôle de l’inflammation et de l’autophagie sélective. T6BP se lie aux chaînes d’ubiquitine et à des partenaires tels que A20/TNFAIP3 et les protéines TRAF afin de moduler la signalisation NF-κB en aval de récepteurs incluant TNFR et les récepteurs de type Toll, contribuant ainsi à ajuster les réponses cytokiniques et antivirales. Elle participe également à la prise en charge autophagique de cargos ubiquitinylés et à des voies de contrôle qualité qui influencent la tolérance au stress cellulaire et la survie. La dérégulation de la signalisation et de la protéostasie liées à TAX1BP1 a été associée à des phénotypes inflammatoires et à des voies pertinentes en oncologie, ce qui en fait un nœud utile pour des études mécanistiques de la régulation immunitaire et de la signalisation par l’ubiquitine.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO T6BP (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène TAX1BP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du TAX1BP1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert TAX1BP1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine T6BP.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en TAX1BP1 pour l'étude de la signalisation de T6BP, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de TAX1BP1 essentiels à la fonction de T6BP
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de TAX1BP1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le T6BP plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le T6BP plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus TAX1BP1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le T6BP plasmide HDR (h) et le T6BP (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie TAX1BP1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles TAX1BP1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.