Plasmide Double Nickase (h) T2-cadherin: sc-401926-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) T2-cadherin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide T2-cadherin Double Nickase (h) et le plasmide T2-cadherin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CDH10. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) T2-cadherin | sc-401926-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) T2-cadherin | sc-401926-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDH10 code la T2‑cadhérine, une molécule d’adhérence cellule‑cellule dépendante du calcium appartenant à la superfamille des cadhérines, qui contribue à la mise en place des tissus ainsi qu’au maintien de l’architecture épithéliale et neuronale. Par l’adhérence homophile et l’association à des complexes liés aux caténines, la T2‑cadhérine influence l’organisation du cytosquelette, la signalisation dépendante du contact et les programmes de migration cellulaire. L’expression de CDH10 et ses variations de séquence ont été associées à des phénotypes neurodéveloppementaux et à une connectivité des circuits altérée, et la dérégulation de l’adhérence médiée par les cadhérines est largement pertinente pour des processus oncogéniques tels que l’invasion et les métastases. Ainsi, CDH10 est fréquemment étudié dans des modèles d’adhérence cellulaire, de morphogenèse, de connectivité synaptique et de changements contextuels de la différenciation et de la motilité.
T2-cadherin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CDH10 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CDH10. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CDH10. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CDH10.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.