Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) SYT: sc-401575-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SYT correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SYT Double Nickase (h) et le plasmide SYT Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SS18. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SYT Antibody (D-3): sc-390615
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SYT | sc-401575-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SYT | sc-401575-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SS18 (SYT) code une sous-unité centrale du complexe de remodelage de la chromatine SWI/SNF (BAF), ATP-dépendant, qui régule l’accessibilité de la chromatine et la transcription dépendante de l’ARN polymérase II. En coordonnant la communication entre enhancers et promoteurs ainsi que des programmes d’expression génique spécifiques de lignage, SS18 contribue au contrôle de la progression du cycle cellulaire, de la différenciation et de l’organisation du développement. Une biologie aberrante de SS18 est fortement impliquée dans le sarcome synovial, où des protéines de fusion issues de translocations de SS18 reconfigurent la composition du complexe BAF et ses sorties transcriptionnelles. La dérégulation de la chromatine associée à SS18 éclaire également des études plus larges sur le contrôle épigénétique, les dépendances transcriptionnelles oncogéniques et l’organisation du génome dans les cellules humaines.
SYT Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SS18 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SS18. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SS18. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SS18.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.