Syntaxin 10 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406240

Descripción general

STX10 codifica la sintaxina 10, una proteína t‑SNARE que se localiza principalmente en la red trans‑Golgi y en membranas endosomales, donde regula el acoplamiento de vesículas y la fusión de membranas. Mediante interacciones con otros componentes SNARE y factores de anclaje, la sintaxina 10 ayuda a controlar la recuperación de endosoma a Golgi y el tráfico pos‑Golgi, respaldando el reciclaje de receptores, el transporte relacionado con lisosomas y la homeostasis general de la vía secretora. La alteración del tráfico dependiente de STX10 puede modificar la clasificación de la carga y la dinámica de los orgánulos, procesos que con frecuencia se han implicado en la señalización inmunitaria, la neurobiología y las respuestas al estrés celular. En sistemas modelo, los programas de transporte vesicular alterados que involucran la maquinaria SNARE se han asociado con fenotipos relevantes para enfermedad, como inflamación desregulada y disfunción del neurodesarrollo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Syntaxin 10 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen STX10 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del STX10 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de STX10 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Syntaxin 10.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en STX10 para la investigación de la señalización de Syntaxin 10, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de STX10 críticos para la función de Syntaxin 10
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de STX10 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Syntaxin 10 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Syntaxin 10 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus STX10. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Syntaxin 10 (h) y el plásmido HDR Syntaxin 10 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología STX10 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana STX10 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.