Plasmide Double Nickase (h) Synoviolin: sc-403476-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Synoviolin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Synoviolin Double Nickase (h) et le plasmide Synoviolin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SYVN1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Synoviolin Antibody (4H4): sc-293484
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Synoviolin | sc-403476-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Synoviolin | sc-403476-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SYVN1 code la synovioline, une ligase E3 de type RING résidente du réticulum endoplasmique (RE) qui intervient dans la dégradation associée au RE (ERAD) en ubiquitinylant les protéines mal repliées ou excédentaires en vue de leur élimination par le protéasome. En modulant le contrôle qualité des protéines dépendant de l’ubiquitine, la synovioline influence la protéostasie du RE, les réponses au stress cellulaire et les réseaux de signalisation inflammatoire. Une activité altérée de SYVN1 a été associée à une gestion dérégulée du stress du RE et à une homéostasie protéique anormale dans des contextes incluant l’hyperplasie synoviale et d’autres pathologies liées à l’inflammation. En tant que régulateur de l’ubiquitinylation et de l’ERAD, SYVN1 est largement étudié dans les mécanismes reliant la protéostasie à la survie cellulaire, à la signalisation immunitaire et au remodelage tissulaire.
Synoviolin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SYVN1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SYVN1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SYVN1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SYVN1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.