syncytin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-418235-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- syncytinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase syncytin (h) e o Plasmídeo Double Nickase syncytin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ERVW-1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
syncytin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-418235-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
syncytin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-418235-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ERVW-1 codifica a sincitina, uma glicoproteína fusogénica derivada de uma proteína de envelope que promove a fusão célula–célula dos trofoblastos e contribui para a formação e a manutenção do sinciciotrofoblasto placentário. A fusão de membranas mediada pela sincitina integra-se em vias que regulam a adesão celular, a remodelação do citoesqueleto e a sinalização mediada por recetores na interface materno-fetal, moldando a diferenciação e a função de barreira. Alterações na expressão de ERVW-1 ou na atividade da sincitina têm sido associadas a placentação desregulada e a biologia trofoblástica anómala, e também têm sido investigadas em contextos em que proteínas de envelope retrovirais endógenas influenciam a modulação imunitária e as respostas ao stress celular. Como proteína de envelope específica do ser humano, a sincitina constitui um modelo para estudar como genes retrovirais cooptados afetam programas de desenvolvimento e a homeostase dos tecidos.
syncytin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ERVW-1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ERVW-1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ERVW-1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ERVW-1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.