Sva CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423225

概要

Sva（steroidogenic factor 1–associated）は核内タンパク質であり、内分泌の発生およびホルモン生合成を担う転写プログラムとの相互作用を通じて、ステロイド産生関連遺伝子の発現制御に関与すると考えられています。マウス細胞では、Svaは核内受容体依存的転写の調節と関連し、クロマチン環境と組織特異的な遺伝子制御を統合する経路に影響を与えます。ステロイド産生の転写ネットワークの制御異常は、性腺および副腎の分化や、その下流の内分泌恒常性に影響し得るため、Svaは発生・代謝表現型の機構解明研究において重要な標的となります。Svaの機能喪失または機能獲得の解析は、細胞分化状態とホルモン応答性シグナル伝達を結び付ける転写回路の解明に役立ちます。

Sva CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSva遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Sva内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Svaのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Svaタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Svaシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Sva欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Svaの機能に不可欠なSvaエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Svaゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Sva CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSva CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Sva遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Sva HDRプラスミド（m）および Sva HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSvaホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSva標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。