Particules Lentivirales d'Activation (h) SUZ12: sc-401551-LAC

Le gène humain **SUZ12** code un composant central du **complexe répressif Polycomb 2 (PRC2)**, qui coopère avec **EZH2** et **EED** pour établir et maintenir la répression transcriptionnelle via la **triméthylation de H3K27**. En régulant la compaction de la chromatine et des programmes d’expression génique spécifiques de lignée, SUZ12 influence les voies du développement, les décisions de destinée cellulaire et le contrôle du cycle cellulaire. Une activité PRC2 dérégulée et des perturbations de SUZ12 sont impliquées dans le remodelage épigénétique observé dans de multiples contextes cancéreux ainsi que dans des phénotypes neurodéveloppementaux, faisant de SUZ12 un nœud clé pour l’étude de la régulation génique dépendante de la chromatine. L’interrogation fonctionnelle de SUZ12 soutient la recherche sur le silençage médié par Polycomb, le contrôle des interactions enhancer-promoteur et le dialogue épigénétique avec la méthylation de l’ADN et l’acétylation des histones.

Les particules d'activation lentivirales SUZ12 (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de SUZ12 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales SUZ12 (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription SUZ12, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de SUZ12. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif SUZ12 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.