Plásmido CRISPR de Activación (h) Superoxide Dismutase 3/SOD3: sc-402505-ACT

El gen humano **SOD3** codifica la **superóxido dismutasa extracelular 3**, una metaloenzima secretada dependiente de **Cu/Zn** que cataliza la dismutación del anión superóxido a **peróxido de hidrógeno** y **oxígeno** en el espacio extracelular y en la matriz perivascular. Al limitar las especies reactivas de oxígeno y preservar la biodisponibilidad del óxido nítrico, SOD3 influye en la homeostasis redox, la señalización endotelial y las vías de remodelación de la matriz extracelular. La expresión o actividad alterada de SOD3 se ha asociado con mecanismos impulsados por el estrés oxidativo implicados en la fisiopatología cardiovascular y pulmonar, el daño tisular inflamatorio y la dinámica del microambiente tumoral. Como antioxidante extracelular clave, SOD3 se estudia con frecuencia en contextos como la biología vascular, la fibrosis, el tráfico de células inmunitarias y los programas transcripcionales regulados por el estado redox.

Superoxide Dismutase 3/SOD3 El plásmido de activación CRISPR (h) proporciona un enfoque específico y no destructivo para regular al alza la expresión endógena de SOD3 sin alterar la secuencia de ADN subyacente.

Superoxide Dismutase 3/SOD3 El plásmido de activación CRISPR (h) es un sistema mediador de activación sinérgica (SAM) de tres plásmidos diseñado para la regulación al alza transcripcional altamente eficiente y específica del locus SOD3 en líneas celulares humanas. El sistema se basa en una Cas9 catalíticamente inactiva (dCas9) que porta dos mutaciones inactivadoras (D10A y N863A) que eliminan la actividad nucleasa al tiempo que conservan la unión al ADN. Esta dCas9 se fusiona con VP64, un potente activador transcripcional, y se coexpresa con un gen de resistencia a la blasticidina para la selección. El segundo plásmido codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1, un complejo activador secundario que actúa en conjunto con dCas9-VP64, junto con un gen de resistencia a la higromicina. El tercer plásmido codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 que reclutan el complejo MS2-p65-HSF1 al sitio de activación, acompañado de un gen de resistencia a la puromicina. Los tres plásmidos se administran en una proporción de masa de 1:1:1 para una expresión equilibrada de todos los componentes del sistema.

Una vez ensamblado en el locus diana, el complejo SAM se une aproximadamente 200 pb aguas arriba del sitio de inicio transcripcional SOD3, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma coordinada para reclutar la maquinaria transcripcional e impulsar la regulación al alza de la expresión endógena de Superoxide Dismutase 3/SOD3. A diferencia de la Cas9 con actividad nucleasa, dCas9 no introduce roturas de doble cadena ni modifica la secuencia genómica, preservando el locus nativo SOD3 y permitiendo el estudio de las respuestas transcripcionales dependientes de Superoxide Dismutase 3/SOD3 en el locus endógeno, lo que la convierte en una herramienta valiosa para estudios funcionales, la identificación de genes diana y la modelización de la restauración de la vía Superoxide Dismutase 3/SOD3 en células tumorales con expresión de SOD3 silenciada o reducida.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.