SUN2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404746

概要

SUN2 は、SUN ドメインを含む核内膜（内核膜）タンパク質をコードしており、LINC（nucleoskeleton and cytoskeleton linker：核骨格‐細胞骨格連結）複合体の中核構成要素です。SUN2 は核ラミンに結合し、核周囲腔を隔てて KASH ドメインタンパク質と相互作用することで、核をアクチン細胞骨格に連結し、核の位置決め、メカノトランスダクション（機械刺激の情報伝達）、および細胞骨格由来の力の伝達を制御します。SUN2 は、適切な核‐細胞骨格連結性に依存する核膜の完全性、クロマチン構造の維持、DNA 損傷応答にも寄与します。SUN2 を含む LINC 複合体構成要素の機能異常は、ラミノパチー、心筋症、筋疾患、ならびにがんに伴う核構造変化に関連する表現型と関連づけられています。

SUN2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSUN2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SUN2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SUN2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SUN2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SUN2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SUN2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SUN2の機能に不可欠なSUN2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SUN2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SUN2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSUN2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SUN2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SUN2 HDRプラスミド（h）および SUN2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSUN2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSUN2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。