Plasmide Double Nickase (h) SULT1A2: sc-405799-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SULT1A2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SULT1A2 Double Nickase (h) et le plasmide SULT1A2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SULT1A2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SULT1A2 | sc-405799-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SULT1A2 | sc-405799-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **SULT1A2** code une sulfotransférase cytosolique qui catalyse la conjugaison au sulfate de composés phénoliques en utilisant le 3′-phosphoadénosine-5′-phosphosulfate (PAPS) comme donneur de sulfate, ce qui augmente la solubilité des substrats et module leur bioactivité. Cette activité de métabolisme de phase II contribue à l’élimination des xénobiotiques et à la biotransformation de petites molécules endogènes, en interaction avec des réseaux cellulaires de détoxification qui conditionnent l’exposition à des intermédiaires réactifs. Des variations de la capacité de sulfatation peuvent influer sur l’équilibre entre détoxification et bioactivation de certains composés, reliant l’activité de SULT1A2 aux différences interindividuelles de susceptibilité étudiées en toxicologie et en carcinogenèse chimique. SULT1A2 est donc pertinent pour des travaux portant sur la régulation des enzymes métaboliques, la spécificité de substrat et les réponses à l’échelle des systèmes face à des facteurs de stress environnementaux et pharmacologiques.
SULT1A2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SULT1A2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SULT1A2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SULT1A2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SULT1A2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.