STK16 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423194

Descripción general

El gen murino **Stk16** codifica la quinasa de serina/treonina 16 (STK16), una quinasa constitutivamente activa enriquecida en el Golgi y en compartimentos asociados a membranas, que contribuye al tráfico de proteínas, a la organización del Golgi y a la regulación de la dinámica de la vía secretora. La actividad de STK16 se ha vinculado al control de programas de crecimiento y supervivencia celular, con crosstalk descrito con nodos de señalización que influyen en la proliferación y las respuestas al estrés. Al modular procesos dependientes de la fosforilación, STK16 puede moldear el transporte intracelular y fenotipos asociados al ciclo celular relevantes para estudios de homeostasis tisular. La señalización de quinasas desregulada y las redes de tráfico alteradas se observan con frecuencia en estados celulares asociados a enfermedades, lo que convierte a **Stk16** en una diana útil para la investigación mecanística de dependencias de vías en modelos murinos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO STK16 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Stk16 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Stk16 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Stk16 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína STK16.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Stk16 para la investigación de la señalización de STK16, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Stk16 críticos para la función de STK16
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Stk16 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido STK16 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido STK16 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Stk16. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR STK16 (m) y el plásmido HDR STK16 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Stk16 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Stk16 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.