Plasmide Double Nickase (h) STEAP2: sc-410402-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) STEAP2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide STEAP2 Double Nickase (h) et le plasmide STEAP2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant STEAP2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) STEAP2 | sc-410402-NIC | 20 µg | $410.00 |
STEAP2 (antigène épithélial prostatique à six domaines transmembranaires 2) est une métalloréductase associée à la membrane, enrichie dans l’épithélium prostatique, qui catalyse la réduction des ions ferriques et cuivriques, soutenant l’entrée cellulaire du fer et du cuivre ainsi que l’homéostasie redox. En modulant la disponibilité des métaux, STEAP2 influence les réponses au stress oxydatif, le métabolisme mitochondrial et des programmes de signalisation prolifératifs liés à des processus enzymatiques dépendants du fer. Une expression dérégulée de STEAP2 a été rapportée dans le cancer de la prostate et d’autres malignités, où une altération du métabolisme des métaux peut remodeler la croissance des cellules tumorales, leur différenciation et leur caractère invasif. En tant qu’enzyme redox localisée à la surface, STEAP2 est également utile pour étudier le trafic endosomal/sécrétoire et les interactions entre voies de signalisation dépendantes des métaux dans les cellules humaines.
STEAP2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus STEAP2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de STEAP2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de STEAP2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de STEAP2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.