Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
STAU1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423181
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- STAU1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico STAU1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: STAU1 Anticuerpo (C-4): sc-390820
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
STAU1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423181 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen Stau1 de ratón codifica STAU1, una proteína de unión a ARN de doble cadena que media la degradación de ARNm dependiente de Staufen y regula la localización, la estabilidad y la traducción del ARNm. STAU1 participa en el control génico postranscripcional mediante el ensamblaje de complejos ribonucleoproteicos, acoplando la vigilancia del ARN con procesos como la dinámica de los gránulos de estrés y el transporte a lo largo del citoesqueleto. En células de mamífero, la actividad alterada de STAU1 se ha relacionado con un metabolismo del ARN desregulado que afecta la función neuronal y la homeostasis muscular, lo que la hace relevante para estudios de neurodegeneración y fenotipos neuromusculares. Como nodo en redes reguladoras de ARN, STAU1 ofrece un punto de entrada manejable para desentrañar cómo las decisiones sobre el destino del ARNm moldean el estado celular y la producción del proteoma.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO STAU1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Stau1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Stau1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Stau1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína STAU1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Stau1 para la investigación de la señalización de STAU1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Stau1 críticos para la función de STAU1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Stau1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido STAU1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido STAU1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Stau1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR STAU1 (m) y el plásmido HDR STAU1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Stau1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Stau1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.