Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) Stat6: sc-418159-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Stat6 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Stat6 (h) y el plásmido de doble nickasa Stat6 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a STAT6. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Stat6 Anticuerpo (D-1): sc-374021
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Stat6 | sc-418159-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Stat6 | sc-418159-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
STAT6 codifica Stat6, un factor de transcripción latente que se activa aguas abajo de la señalización de los receptores de IL‑4 e IL‑13 a través de quinasas JAK y la posterior dimerización dependiente de fosforilación y translocación al núcleo. En el núcleo, Stat6 se une a elementos reguladores del ADN para controlar programas génicos implicados en la diferenciación Th2, la activación alternativa de macrófagos, la remodelación epitelial y el cambio de clase de las inmunoglobulinas. Esta vía integra señales de citocinas con la cromatina y la maquinaria transcripcional para moldear la inflamación alérgica y las respuestas inmunitarias de tipo 2. La actividad desregulada de STAT6 está implicada en los mecanismos del asma y las enfermedades atópicas, y también se estudia en contextos de polarización inmunitaria asociada a tumores y de transiciones de estado celular inducidas por citocinas.
Stat6 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus STAT6 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de STAT6. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de STAT6. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con STAT6 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.