Plásmido Doble Nickase (h) Stat2: sc-417454-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Stat2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Stat2 (h) y el plásmido de doble nickasa Stat2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a STAT2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Stat2 Anticuerpo (B-3): sc-514193
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Stat2 | sc-417454-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Stat2 | sc-417454-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
STAT2 codifica Stat2, un factor de transcripción central en la señalización de los interferones de tipo I y tipo III que forma el complejo ISGF3 junto con STAT1 e IRF9 para impulsar la expresión de genes estimulados por interferón. Tras la unión a IFNAR, JAK1 y TYK2 fosforilan Stat2, lo que permite su translocación al núcleo y la regulación de la defensa antiviral, la presentación de antígenos y la comunicación cruzada de la inmunidad innata. La actividad de Stat2 influye en las redes de citocinas y en vías de restricción intrínsecas a la célula, moldeando las respuestas a la infección viral y a señales inflamatorias. La señalización desregulada de STAT2 se ha asociado con errores innatos de la inmunidad y con una susceptibilidad alterada a fenotipos de enfermedades infecciosas y mediadas por el sistema inmunitario, por lo que es un objetivo frecuente en la investigación de inmunología mecanística.
Stat2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus STAT2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de STAT2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de STAT2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con STAT2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.