Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO STARS (h): sc-406050
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- STARS Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique STARS, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: STARS Antibody (E-9): sc-393062
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO STARS (h) | sc-406050 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
ABRA code pour STARS (striated muscle activator of Rho signaling), une protéine liant l’actine, enrichie dans le muscle cardiaque et le muscle squelettique, qui relie la dynamique du cytosquelette au contrôle transcriptionnel. STARS favorise la signalisation de RhoA et module la régulation, dépendante de l’actine, de l’expression génique pilotée par SRF/MRTF, intégrant les signaux mécaniques et contractiles aux programmes myogéniques et de réponse au stress. Par ces voies, ABRA influence la différenciation musculaire, le remodelage hypertrophique et les réponses cellulaires à la charge et aux lésions. Une activité dérégulée de STARS a été associée à des signatures transcriptionnelles pertinentes pour les cardiomyopathies et les myopathies, faisant d’ABRA une cible utile pour étudier la signalisation du cytosquelette vers le noyau en biologie musculaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO STARS (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène ABRA dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du ABRA, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert ABRA à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine STARS.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en ABRA pour l'étude de la signalisation de STARS, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de ABRA essentiels à la fonction de STARS
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de ABRA pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le STARS plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le STARS plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus ABRA. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le STARS plasmide HDR (h) et le STARS (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie ABRA pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles ABRA définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.