Stabilin-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406773
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Stabilin-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Stabilin-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Stabilin-1 Anticorpo (4G9): sc-293254
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Stabilin-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406773 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
STAB1 codifica a Stabilin-1, um recetor “scavenger” multifuncional expresso predominantemente por células endoteliais e macrófagos ativados de forma alternativa, nos quais apoia a endocitose e a remoção de diversos ligandos, incluindo lipoproteínas modificadas e material derivado de células apoptóticas. Por meio das suas funções na captação mediada por recetor, no tráfego intracelular e na adesão celular, a Stabilin-1 contribui para a homeostase vascular, a regulação imunitária e processos de remodelação nos microambientes teciduais. A atividade de STAB1 é frequentemente estudada no contexto da polarização de macrófagos e do diálogo cruzado entre estroma e sistema imunitário, que molda a sinalização inflamatória e a renovação da matriz extracelular. A expressão desregulada de STAB1 tem sido associada a estados inflamatórios crónicos e à biologia de macrófagos associados a tumores, oferecendo um ponto de entrada mecanístico para examinar as contribuições mieloides para microambientes relevantes para a doença.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Stabilin-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene STAB1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do STAB1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do STAB1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Stabilin-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de STAB1 para a investigação da sinalização de Stabilin-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) STAB1 críticos para a função Stabilin-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos STAB1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Stabilin-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Stabilin-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus STAB1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Stabilin-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Stabilin-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia STAB1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo STAB1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.