Partículas Lentivirales de Activación (h) ST8Sia III: sc-407120-LAC

ST8SIA3 codifica la sialiltransferasa ST8Sia III, una enzima residente del aparato de Golgi que cataliza la sialilación α2,8 de glicoproteínas y glicolípidos, modelando la composición y el reconocimiento de los glicanos en la superficie celular. Al regular la polisialilación y determinantes sialilados relacionados, ST8Sia III influye en las interacciones célula–célula y célula–matriz, la organización de receptores y el tráfico dentro de las vías secretoras y endocíticas. Los patrones de sialilación alterados se asocian con cambios en la adhesión, la migración y el reconocimiento inmunitario, lo que hace que ST8SIA3 sea relevante para estudios de procesos del neurodesarrollo y de fenotipos de glicosilación asociados a tumores. El análisis funcional de ST8SIA3 puede aclarar cómo la sialilación α2,8 modula las redes de señalización y la biología de las glicoproteínas de membrana en células humanas.

Las partículas de activación lentiviral ST8Sia III (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de ST8SIA3 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral ST8Sia III (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción ST8SIA3, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de ST8Sia III. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo ST8SIA3 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.