Plasmide Double Nickase (m) SSH1: sc-433087-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) SSH1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SSH1 Double Nickase (m) et le plasmide SSH1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Ssh1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) SSH1 | sc-433087-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) SSH1 | sc-433087-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La SSH1 (Slingshot-1) murine est une phosphatase à double spécificité qui régule le remodelage du cytosquelette d’actine en déphosphorylant et en réactivant la cofiline, ce qui favorise le renouvellement de la F-actine et la motilité cellulaire directionnelle. En s’intégrant à la signalisation des GTPases de la famille Rho, aux voies LIMK/cofiline et aux réseaux de phosphatases sensibles au stress, SSH1 contribue à coordonner la dynamique des lamellipodes, la croissance des neurites et la migration dépendante de l’adhérence. Une activité altérée de SSH1 a été associée à une organisation cytosquelettique dérégulée et à des phénotypes de motilité cellulaire déficiente, pertinents pour des études sur le neurodéveloppement, l’inflammation et des modèles d’invasion tumorale. Dans les systèmes murins, SSH1 est donc fréquemment étudiée pour son rôle dans la mécanotransduction, la plasticité synaptique et le remodelage tissulaire dépendant de la migration.
SSH1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ssh1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ssh1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ssh1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ssh1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.