SREC CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406838

Übersicht

SCARF1 kodiert den von Endothelzellen exprimierten Scavenger-Rezeptor (SREC), einen Scavenger-Rezeptor der Klasse F, der ein breites Spektrum an Liganden bindet und internalisiert, darunter modifizierte Lipoproteine und polyanionische Makromoleküle. SREC trägt zum endozytotischen Transport, zur zellulären Adhäsion und zur Beseitigung extrazellulären Materials bei und verknüpft damit das vaskuläre Endothel und die Immunüberwachung mit homöostatischen Aufnahmewegen. Aufgrund seiner Funktionen in Ligandenerkennung und -internalisierung wird SCARF1 in Prozessen wie Entzündung, oxidativen Stressantworten und der Gefäßbiologie untersucht, bei denen eine veränderte Aktivität von Scavenger-Rezeptoren das Gewebemikromilieu beeinflussen kann. Eine Fehlregulation von Scavenger-Rezeptor-Signalwegen wurde mit kardiometabolischen und entzündlichen Krankheitsmechanismen in Verbindung gebracht, was SCARF1 zu einem nützlichen Ziel macht, um Endothel–Immun-Interaktionen in humanen Modellsystemen zu untersuchen.

Das SREC CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SCARF1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SCARF1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SCARF1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SREC-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SCARF1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SREC-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SCARF1-Exone abzielen, die für die SREC-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SCARF1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SREC CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SREC CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SCARF1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SREC HDR-Plasmid (h) und SREC HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SCARF1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SCARF1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.