Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) Src: sc-423151-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Src correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Src Double Nickase (m) et le plasmide Src Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Src. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Src Antibody (H-12): sc-5266
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Src | sc-423151-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Src | sc-423151-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Mouse Src code pour la tyrosine kinase non réceptrice Src, un régulateur central des voies de signalisation en aval des intégrines, des récepteurs à activité tyrosine kinase et des récepteurs immunitaires. L’activité de Src coordonne des cascades de phosphorylation qui contrôlent le remodelage du cytosquelette, la dynamique des adhérences focales, la progression du cycle cellulaire et des voies de survie incluant PI3K–AKT et MAPK/ERK. Par l’intermédiaire de ces réseaux, Src influence la migration cellulaire, des programmes associés à l’invasion et des processus liés à la transition épithélio-mésenchymateuse dans des modèles expérimentaux. Une signalisation Src dérégulée est fréquemment impliquée dans la transformation oncogénique et les phénotypes métastatiques, ce qui en fait une cible couramment utilisée pour disséquer les anomalies de signalisation des kinases dans des contextes pertinents pour la maladie.
Src Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Src dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Src. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Src. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Src.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.