SR-A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m2): sc-422832-KO-2

Descripción general

Msr1 codifica el receptor depurador de clase A (SR-A), un receptor de reconocimiento de patrones enriquecido en macrófagos que se une a lipoproteínas modificadas, células apoptóticas y ligandos microbianos para coordinar la captación y la señalización de la inmunidad innata. SR-A impulsa la endocitosis y la fagocitosis mediadas por receptor, modulando el manejo de lípidos, las respuestas inflamatorias y la resolución del daño tisular mediante la interacción con las vías de los receptores tipo Toll y las redes de citocinas. En modelos murinos, la actividad alterada de Msr1/SR-A se ha asociado con una formación desregulada de células espumosas, inflamación estéril y susceptibilidad a infecciones, lo que lo hace relevante para estudios de procesos similares a la aterosclerosis, la neuroinflamación y los mecanismos de enfermedad metabólica. Su expresión en linajes mieloides también respalda la investigación sobre la polarización de macrófagos, el procesamiento de antígenos y las vías de eliminación en microambientes tisulares complejos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SR-A (m2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Msr1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Msr1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Msr1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SR-A.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Msr1 para la investigación de la señalización de SR-A, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Msr1 críticos para la función de SR-A
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Msr1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SR-A CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SR-A CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Msr1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SR-A (m) y el plásmido HDR SR-A (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Msr1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Msr1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.