Plasmide Double Nickase (h) SPT6: sc-406219-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SPT6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SPT6 Double Nickase (h) et le plasmide SPT6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SUPT6H. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SPT6 Antibody (E-4): sc-393920
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SPT6 | sc-406219-NIC | 20 µg | $410.00 |
SUPT6H code SPT6, une chaperonne d’histones conservée et un facteur d’élongation transcriptionnelle qui s’associe à l’ARN polymérase II afin de coordonner le réassemblage des nucléosomes et de préserver l’intégrité de la chromatine pendant la transcription. En interagissant avec des facteurs tels que le complexe PAF1 et en régulant les profils de modifications des histones, SPT6 fait le lien entre l’élongation transcriptionnelle, la maturation co‑transcriptionnelle des ARN et le maintien épigénétique. Cette activité soutient des programmes globaux d’expression génique qui gouvernent l’identité cellulaire, la prolifération et les réponses au stress. La dérégulation du contrôle de la chromatine dépendant de SPT6 a été impliquée dans des états transcriptionnels aberrants observés dans le cancer et dans d’autres troubles de la transcription et de la régulation du génome.
SPT6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SUPT6H dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SUPT6H. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SUPT6H. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SUPT6H.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.