SPT6 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406219-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SPT6O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SPT6 (h) e o Plasmídeo Double Nickase SPT6 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SUPT6H. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SPT6 Anticorpo (E-4): sc-393920
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SPT6 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406219-NIC | 20 µg | $410.00 |
SUPT6H codifica a SPT6, uma chaperona de histonas conservada e fator de elongação da transcrição que se associa à RNA polimerase II para coordenar a remontagem de nucleossomos e preservar a integridade da cromatina durante a transcrição. Ao interagir com fatores como o complexo PAF1 e ao regular padrões de modificações de histonas, a SPT6 conecta a elongação transcricional ao processamento de RNA co-transcricional e à manutenção epigenética. Essa atividade sustenta programas globais de expressão gênica que governam a identidade celular, a proliferação e as respostas ao estresse. A desregulação do controle de cromatina dependente de SPT6 tem sido implicada em estados transcricionais aberrantes observados no câncer e em outros distúrbios da transcrição e da regulação do genoma.
SPT6 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SUPT6H em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SUPT6H. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SUPT6H. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SUPT6H interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.