Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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spectrin β II Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401818-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- spectrin β IIO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase spectrin β II (h) e o Plasmídeo Double Nickase spectrin β II (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SPTBN1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:spectrin β II Anticorpo (F-7): sc-515592
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
spectrin β II Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401818-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
spectrin β II Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401818-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SPTBN1 codifica a espectrina βII humana, um componente central do citoesqueleto de espectrina–actina associado à membrana, que sustenta a estabilidade da membrana plasmática e organiza a arquitetura cortical. A espectrina βII contribui para a forma celular, a resiliência mecânica e o tráfego intracelular ao atuar como arcabouço para canais iônicos, receptores e complexos de sinalização em domínios especializados da membrana. Por meio de interações com anquirinas e actina, ajuda a coordenar a remodelação do citoesqueleto, o transporte de vesículas e a polaridade celular durante o desenvolvimento e em tecidos diferenciados. Alterações na função de SPTBN1 têm sido associadas a fenótipos do neurodesenvolvimento e à disfunção do citoesqueleto, tornando-o um alvo útil para estudar mecanismos que conectam o arcabouço de membrana à sinalização neuronal e à homeostase celular.
spectrin β II O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SPTBN1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SPTBN1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SPTBN1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SPTBN1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.