Sox9 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400143-LAC

Das humane SOX9-Gen kodiert den Transkriptionsfaktor Sox9, ein DNA-bindendes Protein mit High-Mobility-Group-(HMG)-Box, das während der Entwicklung die Festlegung von Zelllinien und die Gewebemusterbildung steuert. Sox9 reguliert die Chondrogenese und Skeletogenese über transkriptionelle Netzwerke, die mit der TGF-β/BMP-Signalübertragung interagieren und Programme für Gene der extrazellulären Matrix wie COL2A1 und ACAN koordinieren. In epithelialen Kontexten trägt SOX9 zur Aufrechterhaltung von Stamm-/Vorläuferzellen und zur Differenzierung bei, indem es Wnt/β-Catenin- und Notch-assoziierte Transkriptionszustände integriert. Eine fehlregulierte SOX9-Aktivität ist an Entwicklungsstörungen beteiligt, die die Knorpelbildung und die Geschlechtsdetermination betreffen, und wird häufig im Zusammenhang mit onkogener transkriptioneller Reprogrammierung und zellulärer Plastizität untersucht.

Sox9 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente SOX9-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Sox9 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der SOX9-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Sox9-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen SOX9-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.