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Sox10CRISPR激活质粒(h) | sc-400129-ACT | 20 µg | $397.00 |
人类 **SOX10** 基因编码转录因子 Sox10,这是一种高迁移率族(HMG)DNA 结合蛋白,对神经嵴的特化与谱系承诺至关重要,尤其参与胶质细胞与黑色素细胞相关的发育程序。Sox10 统筹调控分化、迁移与存活的转录网络,并与发育信号通路及染色质重塑协同作用,从而调节周围神经系统中靶基因的表达。SOX10 活性异常与影响肠神经系统和周围胶质发育的神经嵴相关疾病(neurocristopathies)以及黑色素细胞生物学失调有关,因此它是研究细胞命运决定与基因调控电路的重要节点。在生物医学研究中,SOX10 常被用于探究髓鞘形成、色素生成以及神经嵴来源细胞可塑性的转录调控机制。
Sox10 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SOX10的表达。
Sox10 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的SOX10基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于SOX10转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Sox10表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的SOX10位点,并能够研究内源性位点上依赖于Sox10的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SOX10表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Sox10通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。