Sox-5 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401854-LAC

SOX5 kodiert den Transkriptionsfaktor Sox-5, ein Mitglied der SRY-verwandten HMG-Box-Familie, das an DNA bindet und linienspezifische Programme der Genexpression formt. In menschlichen Zellen trägt Sox-5 zur Entwicklungsmusterbildung und zu Differenzierungsprozessen bei, einschließlich chondrogener und neuronaler Transkriptionsnetzwerke, indem es die Enhancer-Aktivität und chromatinabhängige Regulation koordiniert. Seine Aktivität überschneidet sich mit Signalwegen, die die Festlegung des Zellschicksals und die Reifung steuern, wodurch SOX5 ein nützlicher Knotenpunkt für die Untersuchung regulatorischer Schaltkreise während der Entwicklung und der Gewebehomöostase ist. Eine fehlregulierte SOX5-Expression wurde mit neuroentwicklungsbezogenen Phänotypen und veränderten Transkriptionszuständen in mehreren Krankheitskontexten in Verbindung gebracht, was seine Relevanz für mechanistische Studien zur Dysbalance genregulatorischer Prozesse unterstreicht.

Sox-5 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente SOX5-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Sox-5 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der SOX5-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Sox-5-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen SOX5-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.