Partículas Lentivirales de Activación (h) Sox-4: sc-401217-LAC

El SOX4 humano codifica el factor de transcripción Sox-4, miembro de la familia HMG-box relacionada con SRY, que se une al ADN y coordina programas de regulación génica dependientes del contexto durante el desarrollo y la homeostasis tisular. La actividad de Sox-4 influye en la especificación del destino celular, en redes transcripcionales asociadas a la transición epitelio-mesénquima y en procesos de diferenciación, interactuando con vías de señalización como Wnt/β-catenina, TGF-β y Notch. La expresión desregulada de SOX4 se ha vinculado a alteraciones de la proliferación, estados tipo célula madre y fenotipos asociados a la invasión en múltiples contextos de cáncer y enfermedades hematológicas, y también se estudia en biología del neurodesarrollo y relacionada con el sistema inmunitario. Como regulador nuclear con amplias dianas aguas abajo, SOX4 constituye un nodo abordable para diseccionar la circuitería transcripcional, las dependencias del estado de la cromatina y la plasticidad de linaje.

Las partículas de activación lentiviral Sox-4 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de SOX4 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Sox-4 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción SOX4, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Sox-4. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo SOX4 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.