Plasmide CRISPR/Cas9 KO Sox-13 (m): sc-423081
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Sox-13 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Sox-13, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Sox-13 Antibody (B-5): sc-515107
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Sox-13 (m) | sc-423081 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène murin Sox13 code le facteur de transcription Sox-13, un membre de la famille SOX qui se lie à l’ADN via une boîte HMG et contribue à programmer l’expression de gènes spécifique de lignée. Sox-13 est impliqué dans la régulation de la différenciation des lymphocytes T, en influençant notamment le développement des lymphocytes T γδ et les réseaux transcriptionnels associés qui contrôlent les décisions de destinée des cellules immunitaires. Par son rôle dans le contrôle transcriptionnel, Sox-13 peut moduler des voies liées à la signalisation du récepteur de l’antigène et à des programmes de différenciation induits par les cytokines. Une activité SOX13 dérégulée a été associée à des déséquilibres immunitaires et à des phénotypes inflammatoires, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques du développement immunitaire et des modèles de maladies à médiation immunitaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Sox-13 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Sox13 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Sox13, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Sox13 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Sox-13.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Sox13 pour l'étude de la signalisation de Sox-13, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Sox13 essentiels à la fonction de Sox-13
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Sox13 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Sox-13 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Sox-13 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Sox13. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Sox-13 plasmide HDR (m) et le Sox-13 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Sox13 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Sox13 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.