Plasmide Double Nickase (m) Sos 1: sc-423075-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Sos 1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Sos 1 Double Nickase (m) et le plasmide Sos 1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Sos1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Sos 1 Antibody (A-9): sc-17793
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Sos 1 | sc-423075-NIC | 20 µg | $410.00 |
La protéine murine SOS1 (Son of sevenless homolog 1) est un facteur d’échange de nucléotides guanyliques (GEF) spécifique de Ras, qui convertit Ras-GDP en Ras-GTP en aval des récepteurs tyrosine kinases activés. Recrutée à la membrane plasmique via GRB2, SOS1 active la signalisation à travers la cascade RAS–RAF–MEK–ERK et contribue à la modulation de la voie PI3K–AKT, reliant les signaux des facteurs de croissance à la prolifération, à la différenciation et au remodelage du cytosquelette. Sos1 participe également au contrôle par rétroaction de la signalisation MAPK et aide à coordonner la dynamique de signalisation des récepteurs dans de multiples tissus. Une activité dérégulée de la voie SOS1–RAS est largement impliquée dans la biologie de la signalisation oncogénique et dans des phénotypes du développement associés à une régulation aberrante de Ras/MAPK, faisant de Sos1 un nœud clé pour les études mécanistiques.
Sos 1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Sos1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Sos1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Sos1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Sos1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.