Plasmide CRISPR/Cas9 KO SOCS-5 (h): sc-402585

Présentation

SOCS5 code le suppresseur de la signalisation des cytokines 5 (SOCS‑5), un membre de la famille SOCS qui atténue la signalisation des cytokines et des récepteurs de facteurs de croissance grâce à une reconnaissance des cibles médiée par le domaine SH2 et au recrutement, dépendant de la SOCS box, de complexes de ligase de l’ubiquitine. SOCS‑5 participe à la régulation négative de la voie JAK/STAT et peut moduler des voies associées aux récepteurs, liées à l’activation des cellules immunitaires, aux réponses inflammatoires et aux programmes de différenciation. En contrôlant l’amplitude et la durée des signaux, SOCS‑5 contribue à la régulation par rétrocontrôle des sorties transcriptionnelles induites par les cytokines et au dialogue avec des processus associés à la voie MAPK. Une expression ou une fonction dérégulée de SOCS5 a été associée à une signalisation immunitaire aberrante et a été étudiée dans des contextes de reprogrammation des voies de signalisation liées au cancer et de mécanismes des maladies inflammatoires.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO SOCS-5 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène SOCS5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du SOCS5, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert SOCS5 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine SOCS-5.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en SOCS5 pour l'étude de la signalisation de SOCS-5, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de SOCS5 essentiels à la fonction de SOCS-5
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de SOCS5 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le SOCS-5 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le SOCS-5 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus SOCS5. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le SOCS-5 plasmide HDR (h) et le SOCS-5 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie SOCS5 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles SOCS5 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.