Plasmide Double Nickase (m) SOCS-1: sc-419667-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) SOCS-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SOCS-1 Double Nickase (m) et le plasmide SOCS-1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Socs1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SOCS-1 Antibody (E-9): sc-518028
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) SOCS-1 | sc-419667-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin *Socs1* code le suppresseur de la signalisation des cytokines 1 (SOCS-1), un régulateur central de rétrocontrôle négatif des voies de signalisation des cytokines et des facteurs de croissance. SOCS-1 limite l’activité de la voie JAK/STAT en se liant, via son domaine SH2, à des complexes de signalisation phosphorylés et en favorisant leur dégradation dépendante de l’ubiquitine grâce à l’activité de ligase E3 contenant une SOCS box. En restreignant les réponses en aval des interférons, des interleukines et d’autres signaux inflammatoires, SOCS-1 contribue au maintien de l’homéostasie immunitaire et à l’ajustement de l’activation des cellules immunitaires innées et adaptatives. Une activité ou une expression dérégulée de SOCS-1 est associée à une signalisation inflammatoire aberrante et à une surveillance immunitaire altérée, ce qui en fait une cible couramment utilisée pour étudier l’immunopathologie et les programmes cellulaires induits par les cytokines.
SOCS-1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Socs1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Socs1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Socs1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Socs1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.