Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) SNX9: sc-403578-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SNX9 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SNX9 Double Nickase (h) et le plasmide SNX9 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SNX9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SNX9 Antibody (G-5): sc-166863
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SNX9 | sc-403578-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SNX9 | sc-403578-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SNX9 (sorting nexin 9) est une protéine adaptatrice à domaine PX-BAR qui couple la reconnaissance des phosphoinositides au remodelage membranaire et au trafic endocytique. Elle participe à l’endocytose médiée par la clathrine et au bourgeonnement des vésicules en coordonnant la détection de la courbure avec le recrutement de régulateurs de l’actine et de la dynamine lors de la scission vésiculaire. Par ces fonctions, SNX9 influence l’internalisation des récepteurs, l’atténuation de la signalisation et la dynamique du cytosquelette, des processus pertinents pour la migration cellulaire et les réseaux de signalisation proliférative. Des altérations du trafic dépendant de SNX9 ont été étudiées dans le contexte de la signalisation oncogénique, de la neurobiologie et des voies d’entrée des pathogènes, où le contrôle de l’endocytose influe sur l’homéostasie cellulaire.
SNX9 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SNX9 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SNX9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SNX9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SNX9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.